Специальные питательные среды

Мясопептонный бульон с глюкозой

К концентрированному мясопептонному бульону с pH 7,0-7,2 добавляют 1% глюкозы, предварительно растворив ее в небольшом количестве воды. Все тщательно размешивают, разливают в пробирки и стерилизуют в автоклаве при 116 °С в течение 15 мин.

Сахарный мясопептонный агар

К мясопептонному агару прибавляют 1% глюкозы. Сахар растворяют в небольшом количестве воды и прибавляют к уже готовому расплавленному мясопептонному агару. Агар тщательно перемешивают, разливают по пробиркам, стерилизуют в автоклаве 15-20 мин при 116°С.

Среда Китта-Тароцци

Среда Китта-Тароцци - специальная питательная среда для: выращивания анаэробов и накопления токсинов. На дно пробирок кладут мелкие кусочки говяжьей печени, предварительно сваренные и хорошо промытые горячей водой на сите (в противном случае они дают муть). Печень укладывают в пробирки с таким расчетом, чтобы высота слоя была 1-1,5 см. Содержимое пробирок заливают концентрированным мясопептонным бульоном, в который предварительно введено 1% глюкозы и 0,15% агара. Высота слоя прилитого бульона должна быть 6-7 см, а pH 7,0-7,2. Стерилизуют среду в автоклаве при 120°С в течение 20 мин. Перед употреблением среду следует прогреть в кипящей водяной бане в течение 20 мин для удаления растворившегося в среде воздуха.

Говяжью печень, так же как и мясную воду, можно готовить впрок. Для этого ее режут кусочками 5х5 см, хорошо промывают холодной водой и варят в эмалированной кастрюле. Сваренную печень промывают на сите горячей водой, укладывают в стеклянные банки, заливают водопроводной водой, закатывают и стерилизуют в автоклаве 50-60 мин при 120°С. Брать. Стеклянные банки емкостью более 0,5 л не рекомендуется.

Агар (полужидкий) для трубок Вейона (для культивирования анаэробов)

Агар для трубок Вейона готовят из концентрированного мясопептонного бульона с добавлением 1% глюкозы и 1% агара. Стерилизуют в автоклаве при температуре 120 °С в течение 20 мин.

Среды для выделения гемолитического стафилококка

Глюкозо-солевой агар. К 100 мл мясопептонного агара добавляют 1 г глюкозы и 5 г чистой поваренной соли. Среду готовят впрок, стерилизуют в автоклаве 15-20 мин при 120 °С. Мясопептонный солевой бульон. Мясопептонный солевой бульон используется для накопления стафилококка. К концентрированному мясопептонному бульону прибавляют от 6 до 7,5% поваренной соли. Разливают в пробирки и среду стерилизуют в автоклаве 20 мин при 120 °С.

Среды для галофилов и галобов

Для галофилов и галобов готовят обычные мясопептонные среды, но с повышенным содержанием поваренной соли: к средам для галофилов ее обычно прибавляют 10-15%, к средам для галобов - 20%. Твердые агаровые среды готовят с повышенным процентом агара, так как большое содержание соли влияет на желирующую способность агара и питательная среда может не застыть.

Среда для выделения термофильных аэробных бактерий - возбудителей плоскокислой порчи

К мясопептонному агару с 1 % глюкозы и pH 7,0-7,2 добавляют 0,004% бромкрезолпурпура. Среду разливают в пробирки по 10-15 мл и стерилизуют в автоклаве при 120 °С в течение 20 мин. Приготовленная среда должна иметь слабо-фиолетовую окраску.

Печеночный бульон

Печеночный бульон служит для выявления термофильных анаэробов, не образующих сероводорода. 500 г мелко нарезанной говяжьей печени заливают 1 л водопроводной воды, кипятят в течение 1 ч, доводят pH смеси до 7,0-7,2 и кипятят еще 10 мин. Затем бульон отцеживают через ткань, доводят объем фильтрата до 1 л, добавляют 10 г пептона, 1 г двуфосфорнокислого калия и 1 г растворимого крахмала. Среду фильтруют через бумажный фильтр и еще раз проверяют pH. Он должен быть равным 7,0. Перед розливом на дно пробирок кладут кусочки печени высотой 2,0-2,5 см, а затем наливают печеночный бульон по 6-7 мл в каждую пробирку. Стерилизуют 20 мин при 120°С. Перед употреблением среду следует нагреть на водяной бане в течение 20 мин для удаления растворенного в жидкости воздуха.

Сульфатный агар

Сульфатный агар является средой для выявления термофильных анаэробов, образующих сероводород. В состав среды входят следующие компоненты: триптон - 10 г, сернокислый натрий (сульфат натрия) - 1 г, агар - 20 г, вода - 1 л. Реакцию среды необязательно доводить до определенного значения pH. Перед розливом в каждую пробирку помещают чистую железную пластинку или гвоздь, а затем наливают питательную среду и стерилизуют, как обычно.

Питательная желатина (МПЖ)

К 1 л готового концентрированного мясопептонного бульона прибавляют 150-200 г мелко измельченной желатины. Желатина приготовляется из костей, хрящей, сухожилий различных животных в виде пластинок или тонких листов. По химическому составу это кислый азотистый продукт, состоящий главным образом из белка глутина.

Мясопептонный бульон с добавленной желатиной расплавляют на водяной бане при температуре 80°С, устанавливают pH 7,0-7,2, разливают по пробиркам и стерилизуют в кипятильнике Коха 3 дня подряд по 20 мин. Если желатина дает осадок, среду следует осветлить перед стерилизацией белком куриного яйца. Расплавленную желатину охлаждают до 50 °С и добавляют на 1 л среды один белок, предварительно взбитый в пену с двойным количеством воды. После тщательного размешивания среду кипятят 10 мин, фильтруют через вату и, разлив в пробирки, стерилизуют, как указано выше. Питательная желатина используется для определения протеолитической способности микробов.