Микробиологическое исследование воздуха

В воздухе развития микроорганизмов не происходит, их пребывание здесь является временным. Однако количество микроорганизмов в воздухе может быть довольно значительным, оно находится в прямой зависимости от запыленности воздуха и скученности людей. Микрофлору воздуха чаще всего составляют кокки, сарцины, дрожжи, плесневые грибы, пигментные и спорообразующие микроорганизмы, а иногда и патогенные микробы. На пищевых предприятиях приходится считаться с загрязненностью воздуха микробами как с фактором, способствующим увеличению бактериальной обсемененности пищевых продуктов.

Для исследования воздуха на загрязненность микробами в производственных цехах консервного завода может быть применен один из наиболее простых методов контроля - чашечный (или седиментационный), предложенный Р. Кохом. Сущность метода заключается в том, что на поверхность застывшей твердой среды в стерильной чашке Петри производится «посев» микроорганизмов, оседающих из воздуха (принцип «микробного дождя»).

Чашечному методу присущ ряд недостатков:

1. На чашки Петри не оседают микробные клетки, связанные с самыми мелкими частичками пыли или влаги, так как оседание их крайне замедленно из-за ничтожности веса.

2. Быстрота оседания разных по величине частиц пыли различна.

3. На чашки могут осесть не только микроорганизмы, находящиеся непосредственно над поверхностью питательной среды, но и заносимые из прилегающих воздушных слоев.

4. Считается, что с помощью седиментационного метода, определяется всего лишь 35-60% микроорганизмов, содержащихся в воздухе.

И тем не менее, несмотря на перечисленные недостатки, благодаря своей простоте чашечный метод широко применяется на практике. Хотя и ориентировочно, но он дает возможность сравнительно быстро определить качественный и количественный состав микрофлоры производственных помещений.

Для учета общего количества микробов в воздухе в качестве питательной среды употребляется мясопептонный агар, для определения гнилостных микроорганизмов - мясопептонная желатина. Плесени и дрожжи учитывают на сусло-агаре. На чашках Петри с железосульфатным агаром можно выявить в воздухе наличие анаэробных микроорганизмов. Обычно для анализа воздуха производственных помещений готовят две чашки Петри: одну с мясопептонным агаром для учета аэробной бактериальной микрофлоры и другую с сусловым агаром для выявления дрожжей и плесеней.

Техника «посева» воздуха на чашки Петри следующая. В стерильные чашки Петри с соблюдением правил асептики вливают 20 мл соответствующей расплавленной питательной среды. Закрыв чашку, равномерно распределяют расплавленную среду по всему дну чашки. Чашки Петри с застывшей питательной средой, завернув их в стерильную бумагу (можно в ту, в которой производилась стерилизация чашек), переносят в исследуемое помещение. Разложив бумагу на столе, ставят на нее рядом друг с другом чашки и открывают их. Место для экспозиции чашек выбирают такое, где нет движения воздуха (сквозняка). Крышки одним концом кладут на бумагу, а другим на самый край бортика открытой чашки, стараясь не закрывать поверхности среды.

Чашки держат открытыми в течение 5-20 мин в зависимости от степени загрязненности воздуха. Затем чашки закрывают и помещают для инкубации в термостаты: чашку с МПА - на 2 суток при 37 °С, чашку с сусловым агаром - на 5 суток при комнатной температуре (22-24 °С). После инкубации посевов подсчитывают выросшие колонии и при необходимости исследуют их качественно (т.е. готовят мазки, окрашивают их и микроскопируют).

Практически колония, как уже указывалось, считается потомством одного микроорганизма, поэтому по числу выросших колоний можно примерно судить о количестве микробов, содержавшихся в воздухе в момент посева. Расчет ведут на 100 см2 для каждой чашки (в отдельности) по формуле

Расчет для каждой чашки

где N - количество микробов, осевших на 100 см2 за время экспозиции; n - количество колоний, выросших на чашке; r - радиус чашки.

Считается, что в течение 5 мин на площадь 100 см2 осаждается примерно столько микробов, сколько их содержалось в 10 м3 воздуха. Если в среднем на чашке с МПА радиусом 4,5-5 см при экспозиции в течение 20 мин выросло до 200 колоний, воздух считается чистым, свыше 200 колоний - загрязненным. Результат анализа воздуха записывают в журнал.