Феррицианидный метод определения сахаров

В основе феррицианидного метода находится способность редуцирующих сахаров фруктозы, глюкозы, лактозы и мальтозы при нагревании со щелочным раствором железосинеродистого калия (феррицианида) восстановливать последний в железистосинеродистый калий (ферроцианид) по следующему уравнению:

Принцип метода заключается в том, что щелочной раствор железосинеродистого калия (установленной концентрации) оттитровывают испытуемым раствором, содержащим сахар, в присутствии метиленовой сини в качестве индикатора. Феррицианидным методом определяют редуцирующие сахара, а также общее содержание сахаров в испытуемых растворах после инверсии сахарозы. Для определения сахаров данным методом применяют 1%-ный раствор железосинеродистого калия (K3Fe(CN)6).

Методика определения. Предварительно проводят ориентировочное определение. Для этого в коническую колбу емкостью 100 мл приливают 20 мл 1%-ного раствора железосинеродистого калия и 5 мл 2,5 н. раствора едкого натра, затем приливают одну каплю 1%-ного раствора метиленового голубого и нагревают содержимое колбы до кипения. Кипящий раствор титруют из бюретки испытуемым раствором, осторожно приливая его по каплям через каждые несколько секунд; титрование проводят до исчезновения синей окраски раствора. Для титрования применяют бюретку, снабженную специальным наконечником (рис. 21). Наиболее точным считается результат, когда на титрование расходуется 5-6 мл испытуемого раствора.

При концентрации сахара в исследуемом растворе от 0,25% и более применяют 20 мл 1%-ного раствора железосинеродистого калия, при меньшей концентрации - 10 мл 1 %-ного раствора железосинеродистого калия и 2,5 мл 2,5 н. раствора едкого натра. После ориентировочного определения к отмеренному объему 1 %-ного раствора железосинеродистого калия и раствора 2,5 н. едкого натра приливают из бюретки испытуемый раствор на 0,2-0,3 мл меньше, чем было израсходовано при ориентировочном опыте. Колбу с содержимым нагревают до кипения в течение 0,75-1 мин, а кипятят в течение 1 мин, затем добавляют одну каплю метиленового синего, уменьшают огонь и дотитровывают раствор. Для этого приливают из бюретки по одной капле испытуемого раствора до исчезновения синей окраски содержимого колбы.

Содержание сахара в процентах (х) вычисляют по одной из следующих формул:

где К - поправка на точно 1%-ный раствор железосинеродистого калия; g - навеска исследуемого вещества, г; V - объем испытуемого раствора, пошедший на титрование 20 или 10 мл 1 %-ного раствора железосинеродистого калия, мл; V1 - общий объем вытяжки, приготовленный из взятой навески, мл.

Приготовление растворов

1. Железосинеродистый калий (красная кровяная соль, феррицианид) 1%-ный раствор, 10 г химически чистой красной кровяной соли растворяют в 1 л дистиллированной воды. Поправку К устанавливают следующим образом. В коническую колбу с притертой пробкой берут пипеткой 50 мл приготовленного 1 %-ного раствора K3Fe(CN)6, затем сюда же прибавляют 20 мл 10%-ного раствора ZnSO4 (не содержащего железа) и 20 мл 20%-ного раствора KJ (не содержащего свободного йода). Содержимое взбалтывают в закрытой колбе и тотчас же титруют выделившийся йод 0,1 н. раствором гипосульфита в присутствии крахмала в качестве 74 индикатора. Поправку К вычисляют с точностью до четвертого знака по формуле

где V - количество 0,1 н. раствора гипосульфита, пошедшего на титрование выделившегося йода, мл; 0,03291 - количество K3Fe(CN)6 в 1 мл раствора, г.

Раствор K3Fe(CN)6 хранят в склянке из темного стекла.

2. Едкий натр 2,5 н. раствор. Вначале готовят 45%-ный раствор NaOH и оставляют его в покое на 10 дней для оседания образовавшейся мути. Из 45%-ного раствора NaOH соответствующим разбавлением приготовляют 2,5 н. раствор.

Точность этого раствора устанавливают титрованием его раствором соляной или серной кислоты в присутствии индикатора метилрота. На 10 мл точно 2,5 н. раствора NaOH должно пойти 25 мл 1 н. раствора соляной или серной кислоты. Если раствора кислот израсходовано больше или меньше этого количества, то концентрацию 2,5 н. раствора NaOH соответственно уменьшают разбавлейием или увеличивают добавлением 45%-ного раствора NaOH.